Giải Câu hỏi 3 trang 15 Chuyên đề Sinh học 12

Lời giải

Phân tích: Trong quy trình tách chiết DNA, sau khi đã phá vỡ tế bào và loại bỏ protein, DNA vẫn còn hoà tan trong dung dịch nước (do phân tử DNA tích điện âm, ưa nước). Muốn thu được DNA ở dạng tủa (nhìn thấy được, dạng sợi trắng đục), ta phải làm cho DNA kết tủa và tách ra khỏi dung dịch.

DNA được kết tủa bằng:

a) Cồn (ethanol) lạnh (thường là ethanol 70 – 96% để lạnh ở khoảng 0 °C), hoặc isopropanol (cồn isopropylic).
- Đây là các dung môi hữu cơ. Khi đổ cồn lạnh vào dung dịch chứa DNA, do DNA không tan trong cồn nên các phân tử DNA sẽ co cụm lại và kết tủa thành những sợi/khối màu trắng đục nổi lên ở mặt phân cách giữa lớp dung dịch và lớp cồn.
- Dùng cồn lạnh để giảm độ hoà tan của DNA và hạn chế hoạt động của enzyme phân huỷ DNA (DNase), giúp DNA tủa tốt hơn và không bị phân cắt.

b) Muối (ví dụ NaCl) phối hợp cùng cồn.
- Ion dương của muối (Na⁺) trung hoà các nhóm phosphate tích điện âm trên khung DNA, làm giảm lực đẩy tĩnh điện giữa các phân tử DNA, nhờ đó DNA dễ liên kết, co cụm và kết tủa khi gặp cồn.
- Vì vậy trong thực hành, người ta thường bổ sung muối vào dung dịch trước, rồi mới nhỏ cồn lạnh để DNA kết tủa hiệu quả.

Kết luận: DNA được kết tủa chủ yếu bằng cồn (ethanol) lạnh hoặc isopropanol, thường kết hợp với muối (NaCl) để DNA tủa tốt hơn.

Đáp số